ニワトリモノクローナル抗体作製受託サービス (ALAgene Technology)

特長

 哺乳動物を宿主として用いた免疫では、高い相同性を持つ抗原に対して抗原作製が困難(免疫寛容)とされています。哺乳動物と進化的に離れた鳥類のアミノ酸配列は、哺乳動物分子と相同性が低いため、上記問題を回避可能です。

ニワトリを宿主として使用することで、
・哺乳類間で相同性の高い分子に対する抗体
・哺乳類間で交差反応性を持つ抗体
・吸収操作による目的部位特異的な抗体
・HAMAなどの偽陽性反応を回避できる抗体
の取得が可能です。

作業概要

工程 内容 納品物 期間 備考

免疫
 ・ニワトリ3羽
 ・経時的抗血清回収、抗体価確認
 ・抗血清回収、脾臓、RNA回収(1羽)

抗血清 約3ヵ月

【オプション】
・追加免疫、経時的抗血清回収、抗体価確認
・通常の免疫を細胞免疫に変更
・追加脾臓・RNA回収

②-1 ライブラリ構築・パニング
 ・ファージライブラリ作製
 ・パニング
 ・反応性確認
 – 約1ヵ月  【オプション】
・追加ライブラリ作製
・追加パニング
・パニングをセルパニングに変更
②-2 scFv抗体のスクリーニング
 ・scFv抗体クローニング
 ・スクリーニング(ELISA plate 8枚分)
 ・塩基配列確認(47クローンまで)
約1ヵ月 【オプション】
・ELISAをFCM解析に変更
・ELISAをBIACORE解析に変更
・追加スクリーニング
・追加塩基配列確認
・追加scFv抗体生産
二価抗体作製、一過性発現および抗体精製
 ・二価抗体発現ベクター構築
 ・293細胞への遺伝子導入
 ・一過性発現、培養上清回収
 ・抗体精製
 ・反応性、精製度確認(ELISA, SDS-PAGE)
精製抗体
(~2 mg)
約1.5ヵ月 【オプション】
・二価抗体発現ベクター、培養上清納品
・二価抗体発現ベクターは、以下の抗体発現ベクターから選択いただきます
 - ニワトリ抗体発現ベクター(IgY)
 - ニワトリ/マウスキメラ抗体発現ベクター(mIgG1, mIgG2a)
 - ニワトリ/ヒトキメラ抗体発現ベクター(hIgG1, hIgG4)

工程③「一過性発現および抗体精製」は以下から選択

工程 内容 納品物 期間 備考
③-1 一過性発現(30 mL)および抗体精製

精製抗体(目安:~3 mg)

約2ヵ月

 

③-2 一過性発現(60 mL)および抗体精製 精製抗体(目安:~5 mg) 約2ヵ月  
③-3 一過性発現(300 mL)および抗体精製 精製抗体(目安:10~30 mg) 約2ヵ月  
③-4 一過性発現(1200 mL)および抗体精製 精製抗体(目安:40~120 mg) 約2ヵ月  

*当該サービスは株式会社ファーマフーズでの実施となります。
*当該サービスで取得した抗体配列の権利は、株式会社ファーマフーズに帰属します。

 

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